Хемилюминесценция
 О Хемилюминесценции  |  Методы  |  Аппаратура  |  Контакты 
Главная
Новости*

ХемиЛюминесценция
Публикации
Видеолекции
Применение
Патенты

ХЛ Методы
АнтиОксиданты
Клеточная ХЛ
Тканевая ХЛ
ХЛ Диагностика
ХЛ Контроль

ХЛ Аппаратура
Lum-100
Lum-1200
PCU-100
ПО PowerGraph

Поддержка
Отправить письмо
Контакты

 E-Mail:
 info@chemilum.ru
 Телефон:
 +7 (495) 961-47-30

Метод тканевой хемилюминесценции

Митохондрия Термином тканевая хемилюминесценция обозначается хемилюминесцентное свечение, обусловленное свободными радикалами, образующимися в митохондриях клеток в результате нормального физиологического процесса окислительного фосфорилирования. Методом тканевой хемилюминесценции исследуют изолированные участки биологической ткани (биоптаты, срезы, пунктаты и т.п.), в которых сохранена целостность и жизнеспособность клеток.
Таким образом, тканевая хемилюминесценция связана с естественным процессом жизнедеятельности всех клеток биологической ткани, а не со специфическим ответом отдельных типов клеток на стимул (клеточная хемилюминесценция).

Принцип метода тканевой хемилюминесценции заключается в том, чтобы обеспечить в условиях in vitro (т.е. в пробирке) естественную жизнедеятельность биологической ткани, такую же, как и в живом организме или близкую к ней.
Метод тканевой хемилюминесценции Общая схема применения метода тканевой хемилюминесценции показана на рисунке слева. При извлечении биологической ткани из организма нарушается поступление в нее питательных веществ и кислорода, а также изменяется температурный режим. Для восстановления нормальных условий жизнедеятельности кусочек биологической ткани (1) инкубируется в физиологической среде (2), которая аэрируется воздухом или газовой смесью (3) для поддержания постоянного уровня насыщения кислородом.
Существенной особенностью метода тканевой хемилюминесценции является применение специального активатора (усилителя) хемилюминесценции – люцигенина, обеспечивающего преимущественное детектирование супероксидных радикалов, образующихся в митохондриях.

Метод тканевой хемилюминесценции может быть использован для решения следующих научных и прикладных задач:

  1. Определение жизнеспособности биологической ткани. В результате нарушения кровоснабжения органов и тканей прекращается доступ кислорода к клеткам, что приводит остановке работы дыхательной цепи митохондрий. В течение короткого времени гипоксии работа дыхательной цепи митохондрий еще может быть восстановлена, т.е. биологическая ткань сохраняет жизнеспособность. Но длительное состояние гипоксии приводит к необратимым нарушениям работы дыхательной цепи митохондрий, что можно охарактеризовать как потерю жизнеспособности ткани. Метод тканевой хемилюминесценции позволяет определить способность биологической ткани, оказавшейся в состоянии гипоксии, восстанавливать работу дыхательной цепи после возобновления оксигенации, т.е. способность к жизнедеятельности после восстановления нормальных физиологических условий, например, после восстановления кровоснабжения. Метод тканевой хемилюминесценции может иметь важное практическое значение, например, в хирургии и трансплантологии для определения способности к восстановлению и приживлению оперируемых и пересаживаемых органов. Одним из преимуществ метода тканевой хемилюминесценции является возможность ранней диагностики функциональных нарушений жизнеспособности клеток, которые предшествуют структурным нарушениям, выявляемым морфологическими методами.
  2. Определение устойчивости биологической ткани к гипоксии. Описанный в предыдущем пункте подход к определению жизнеспособности ткани может быть использован также для научного изучения переносимости гипоксии различными типами тканей. Метод тканевой хемилюминесценции позволяет в экспериментальных условиях варьировать длительностью гипоксии, определяя временной интервал, в течение которого сохраняется жизнеспособность образца биологической ткани.
  3. Определение токсичности. Метод тканевой хемилюминесценции позволяет в экспериментальных условиях исследовать воздействие различных факторов и веществ (например, ядов и токсинов) на работу дыхательной цепи митохондрий, определяя степень и механизмы их токсичности.

Рекомендуемое оборудование

Для реализации метода тканевой хемилюминесценции рекомендуется использовать следующее оборудование:
  1. Хемилюминометр Lum-100 - обеспечивает термостатирование и возможность аэрации исследуемой пробы.
  2. Перистальтический насос с регулируемой скоростью потока.

Публикации

АКТИВИРОВАННАЯ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНЦИЯ КАК МЕТОД ОЦЕНКИ РАДИКАЛОБРАЗУЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ ТКАНИ МОЗГА
Полимова А.М., Хакимова Г.Р., Владимиров Г.К., Жидкова Т.В., Измайлов Д.Ю., Проскурнина Е.В., Угрюмов М.В., Владимиров Ю.А.
ТЕХНОЛОГИИ ЖИВЫХ СИСТЕМ, 2012, Т.9, №10, C.3-13

Разработана методика исследования радикалобразующей способности ткани мозга, основанная на регистрации люцигенин-активированной ХЛ. Выявлено, что за люцигенин-активированную ХЛ ответственны супероксид радикалы (САР), образующиеся в митохондриях. С помощью предложенной методики показано увеличение внутриклеточного образования САР в ранней симптомной стадии токсин-индуцированного паркинсонизма у мышей.
   Pub_Polimova_2012-3.pdf (2,11 МБ)


ТКАНЕВАЯ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНЦИЯ КАК МЕТОД ОЦЕНКИ СУПЕРОКСИД РАДИКАЛ-ПРОДУЦИРУЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ МИТОХОНДРИЙ
Джатдоева А.А., Полимова А.М., Проскурнина Е.В., Владимиров Ю.А.
ВЕСТНИК РГМУ, 2016, №1, C.54-60

Дисфункция митохондрий лежит в основе развития многих заболеваний человека, включая дегенеративные. Одно из следствий митохондриальной дисфункции — апоптоз функционально-активных клеток. На начальной стадии апоптоза отмечается усиление продукции супероксид анион-радикала (САР). Перспективным методом обнаружения САР в клетках и тканях является метод хемилюминесценции (ХЛ), прежде всего — в присутствии люцигенина, специфичного для САР химического активатора ХЛ.
   Pub_Jatdoeva_2016-54.pdf (512,52 кБ)

 
Патенты

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ТКАНИ И ПРИМЕНЕНИЕ ЭТОГО СПОСОБА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЕЕ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ И/ИЛИ СТЕПЕНИ НЕКРОТИЗАЦИИ
Измайлов Д.Ю., Владимиров Ю.А., Полимова А.М.
ЕВРАЗИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 018686

Изобретение относится к области медицины, биологии, фармакологии, токсикологии. Предложен способ определения функционального состояния биологической ткани по изменению интенсивности свечения при разной интенсивности аэрации. Технический результат - повышение точности определения функционального состояния биологических тканей.
   Patent_EA-018686.pdf (222,91 кБ)

 

В начало страницы  



 
 Copyright© ООО «ДИСофт», 2012-2018. All right reserved.